| 更新時(shí)間： | 2023-10-27 |
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| 廠(chǎng)商性質(zhì)： | 生產(chǎn)廠(chǎng)家 |
雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒本試劑盒主要目的是測定雞血清中雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體的相對水平?？捎糜谠u估雞群雞傳染性法氏囊病病毒疫苗免疫狀況分析。
EA14A00 2016-01版
雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱(chēng)：Diagnostic Kit For Antibodies To
Chicken Infectious Bursal Disease Virus VP2（IBDV-VP2 Ab）,ELISA
【規格】
96T×2/盒
【預期用途】
本試劑盒主要目的是測定雞血清中雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體的相對水平?？捎糜谠u估雞群雞傳染性法氏囊病病毒疫苗免疫狀況分析。
【檢驗原理】
本試劑盒應用固相酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）原理，由包被有高純度的雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗原的微孔反應板、辣根過(guò)氧化物酶標記的抗雞IgG及其它試劑配套組成。其反應機理為包被抗原與樣本中的IBDV-VP2-Ab結合，再與酶標抗雞IgG抗體形成“包被抗原+IBDV-VP2-Ab+酶標抗雞IgG抗體"復合物，加入顯色劑，通過(guò)酶催化反應顯色。顯色深淺與IBDV-VP2-Ab的量成正比，當樣本反應顯色后，經(jīng)酶標儀檢測所得結果超過(guò)設定的臨界值時(shí)結果判為陽(yáng)性，即表明免疫產(chǎn)生了抗體或有自然感染存在。
【主要組成成份】
1 | IBDV-VP2抗原包被板 | 96T×2 | |
2 | 酶標記物 | 22ml | 黃色帽 |
3 | 樣本稀釋液 | 50ml | 透明帽 |
4 | IBDV-VP2-IgG陰性對照血清 | 1.5ml | 綠色帽 |
5 | IBDV-VP2-IgG陽(yáng)性對照血清 | 1.5ml | 紅色帽 |
6 | 顯色劑 | 12ml×2 | 橙色帽 |
7 | 終止液 | 12ml | 藍色帽 |
8 | 20X濃縮洗滌液 | 50ml | 白色帽 |
9 | 蓋板膜 | 2張 | |
10 | 說(shuō)明書(shū) | 1份 | |
【自備器材】
1．酶標儀，雙波長(cháng)450/630nm濾光片
2．精確的微量移液器（單道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul）
3．水浴箱或恒溫箱
4．微量振蕩器
5．洗液吸移裝置
6．一次性槍頭（10ul，200ul）
7．去離子水
【樣本要求】
1．本試劑檢測的樣本為雞血清，樣本應無(wú)菌采集，2℃～8℃貯存應不超過(guò)一周，長(cháng)期應在-20℃以下保存。
2．避免使用嚴重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及污染長(cháng)菌及含疊氮鈉血清樣本。
3．樣本中含有常規用量的EDTA、枸櫞酸鈉或肝素鈉等抗凝劑不影響本實(shí)驗。
【實(shí)驗準備】
試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實(shí)驗前，先取出置室溫30min，可以獲得jia結果。
2．樣本稀釋：用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋?zhuān)♂尩臉颖净旌暇鶆蚰苋〉幂^好結果。
3．配制洗滌液：將試劑盒所提供濃縮洗滌液量取適量體積直接用去離子水稀釋20倍，即可使用。
【檢驗方法】
1．加樣：根據樣本數量，取所需板條，檢測時(shí)，設陰、陽(yáng)性對照各2孔，分別加入不用稀釋的陰、陽(yáng)性對照血清100μl于相應孔中。其余為樣本孔，每孔加100μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本（可做單孔也可雙孔檢驗）。2．溫育：加樣后，蓋上蓋板膜，置37℃溫育30分鐘。
3．洗板：甩去孔內液體，用洗滌液注滿(mǎn)反應板孔，靜置10s，直接甩出，洗滌3次，后一次洗滌后吸干板內液體。
4．加酶：每孔加酶標記物100μl。
5．溫育：加好酶標記物的反應板蓋好蓋板膜，置37℃溫育30分鐘。
6．洗板：同步驟3。
7．顯色：每孔加顯色劑100μl，振蕩混勻，37℃避光反應10分鐘。
8．終止：每孔加終止液50μl，振蕩10秒，充分混勻，終止后即讀數。
9．讀數：以450/630nm雙波長(cháng)檢測，讀取各孔吸光度值（OD值）。
【結果判定】
在酶標儀上測各孔的OD值。檢測結果有效的條件是陽(yáng)性對照孔的平均OD值≥0.6，陰性對照孔的平均OD值必須＜0.15；樣品中抗體存在與否，或樣本中抗體的相對水平的高低由S/P值決定，S/P值計算時(shí)按以下方式處理:
S/P=(樣本OD450/630值-NCx(—))/（PCx(—)-NCx(—))，其中NCx(—)表示陰性對照孔平均OD450/630值，PCx(—)表示陽(yáng)性對照孔平均OD450/630值；當樣本的S/P≥0.2時(shí)判為陽(yáng)性；樣品S/P值＜0.2時(shí)判為陰性。
若進(jìn)行大量樣本檢測時(shí)，可使用試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件進(jìn)行分析數據結果，該軟件可登陸本公司網(wǎng)站下載。
【檢驗結果的解釋】
1．嚴重溶血、血清中纖維蛋白分離不充分、含紅血球樣本可能導致假陽(yáng)性；長(cháng)菌的樣本可能導致假陰性。
2．因個(gè)體差異或免疫時(shí)間長(cháng)短等因素可能會(huì )出現個(gè)別雞只免疫疫苗后檢測結果為陰性。
3．陽(yáng)性結果用于感染雞的血清學(xué)診斷以及流行病學(xué)調查時(shí)需結合其他診斷方法和臨床資料進(jìn)行分析。
【注意事項】
1．本試劑盒僅用于體外診斷。
2．不要使用過(guò)期的試劑盒組分，不要把不用批次的組分混合使用。
3．使用試劑盒之前，一定要仔細閱讀說(shuō)明書(shū)。
4．本試劑盒應按含有傳染性材料對待，試驗廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
5．微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可拆開(kāi)，未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封2℃-8℃保存。未用完的液體試劑應蓋好瓶蓋，與其它配套組份放入試劑盒中于2℃-8℃避光保存。
6．若20倍濃縮洗滌液出現結晶，屬正?，F象，放置37℃至溶解后即可。
7．應用微量移液器加入樣本及試劑，并經(jīng)常校對其準確性。
8．加洗滌液時(shí)應做到滿(mǎn)而不溢，防止孔口有游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。
9．終止液有腐蝕性，若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水沖洗干凈。
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，防止冷凍，有效期12個(gè)月。
【生產(chǎn)日期及批號】
詳見(jiàn)包裝袋和外包裝盒。
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